HPLC ofrece un método rápido, automatizado y altamente preciso para identificar ciertos componentes químicos en una muestra, pero puede ser costoso, complejo y no funciona para todas las muestras. Los laboratorios médicos, forenses, ambientales y de fabricación utilizan la técnica para cuantificar y separar los productos químicos en una muestra. La HPLC tiene ventajas y desventajas en comparación con otras técnicas.
HPLC y técnicas similares
Al igual que otras formas de cromatografía, la HPLC permite la separación de componentes químicos mediante el uso de una fase móvil y una fase estacionaria. La fase móvil es líquida y la fase estacionaria es sólida. Debido a que los diferentes componentes se mueven a diferentes velocidades, se separan entre sí. Las técnicas alternativas incluyen la electroforesis capilar, donde las sustancias migran a través de soluciones en un campo eléctrico, y otros métodos cromatográficos como la extracción en fase sólida, la cromatografía de gases y la cromatografía en capa fina.
Velocidad, eficiencia y precisión
En comparación con otras Las técnicas cromatográficas, como TLC, HPLC, son extremadamente rápidas y eficientes. Utiliza una bomba, en lugar de la gravedad, para forzar un disolvente líquido a través de un material adsorbente sólido, con diferentes componentes químicos que se separan a medida que se mueven a diferentes velocidades. El proceso se puede completar en aproximadamente 10 a 30 minutos, y ofrece alta resolución. Es preciso y altamente reproducible. Debido a que está en gran medida automatizado, las ejecuciones básicas de HPLC se pueden realizar con un entrenamiento mínimo.
Costo y complejidad
A pesar de sus ventajas, el HPLC puede ser costoso y requiere grandes cantidades de compuestos orgánicos caros. Las técnicas como la extracción en fase sólida y la electroforesis capilar pueden ser más baratas e incluso más rápidas, especialmente para el análisis bajo buenas prácticas de fabricación. Aunque es relativamente fácil usar los métodos existentes de HPLC, puede ser complejo resolver problemas o desarrollar nuevos métodos. Esto se debe principalmente a la variedad de módulos, columnas y fases móviles diferentes.
Sensibilidad y resolución
En general, HPLC es versátil y extremadamente preciso a la hora de identificar y cuantificar componentes químicos. Con muchos pasos involucrados, la precisión de HPLC depende en gran medida del proceso automatizado y, por lo tanto, altamente reproducible. La HPLC tiene baja sensibilidad para ciertos compuestos, y algunos no se pueden detectar ya que se adsorben de manera irreversible. Las sustancias volátiles se separan mejor por cromatografía de gases.
