(a) Pasos en la síntesis de nanorattle:esferas de Au de 20 nm, crecimiento del cubo de Ag, reemplazo galvánico que da como resultado una jaula de Au@Ag, carga de tinte, recubrimiento final de Au y funcionalización de la sonda de ADN. (b) TEM de nanotraqueteo. ( c ) Esquema de hibridación del ensayo de hibridación de perlas magnéticas y nanorattle. (d) Pasos del ensayo de nanosonajeros:mezcle perlas magnéticas, nanosonajeros y diana; incubar; concentrarse; y detectar TEM, microscopía electrónica de transmisión. Crédito:Diario de espectroscopia Raman (2022). DOI:10.1002/jrs.6447
Investigadores de la Universidad de Duke han desarrollado un tipo único de nanopartícula llamada "nanorattle" que mejora en gran medida la luz emitida desde el interior de su capa exterior.
Cargado con tintes de dispersión de luz llamados reporteros Raman comúnmente utilizados para detectar biomarcadores de enfermedades en muestras orgánicas, el enfoque puede amplificar y detectar señales de tipos separados de nanosondas sin necesidad de una máquina costosa o un profesional médico para leer los resultados.
En un pequeño estudio de prueba de concepto, los nanosonajeros identificaron con precisión los cánceres de cabeza y cuello a través de un dispositivo de punto de atención habilitado para IA que podría revolucionar la forma en que se detectan estos cánceres y otras enfermedades en áreas de bajos recursos para mejorar la salud global.
Los resultados aparecieron en línea el 2 de septiembre en el Journal of Raman Spectroscopia .
"El concepto de atrapar a los reporteros de Raman en estos llamados nanosonajeros se ha hecho antes, pero la mayoría de las plataformas tenían dificultades para controlar las dimensiones interiores", dijo Tuan Vo-Dinh, profesor distinguido de ingeniería biomédica de R. Eugene y Susie E. Goodson en Duque.
"Nuestro grupo ha desarrollado un nuevo tipo de sonda con un espacio sintonizable con precisión entre el núcleo interior y la cubierta exterior, lo que nos permite cargar múltiples tipos de reporteros Raman y amplificar su emisión de luz llamada dispersión Raman mejorada en la superficie", dijo Vo-Dinh. dijo.
Para hacer nanosonajeros, los investigadores comienzan con una esfera de oro macizo de unos 20 nanómetros de ancho. Después de hacer crecer una capa de plata alrededor del núcleo de oro para hacer una esfera (o cubo) más grande, usan un proceso de corrosión llamado reemplazo galvánico que ahueca la plata, creando una capa en forma de jaula alrededor del núcleo. Luego, la estructura se sumerge en una solución que contiene reporteros Raman cargados positivamente, que son atraídos hacia la jaula exterior por el núcleo de oro cargado negativamente. Luego, los cascos exteriores se cubren con una capa extremadamente delgada de oro para encerrar a los reporteros Raman en el interior.
El resultado es una nanoesfera (o nanocubo) de unos 60 nanómetros de ancho con una arquitectura que se asemeja a un sonajero:un núcleo de oro atrapado dentro de una capa exterior de plata y oro más grande. La brecha entre los dos es de unos pocos nanómetros, que es lo suficientemente grande como para que quepan los reporteros Raman.
Las semillas iniciales de nanoesferas de oro (izquierda) están rodeadas por una jaula de plata porosa y hueca (centro) y se convierten en un nanosonajero lleno de tintes que dispersan la luz dentro de una capa exterior de oro (derecha). Los nanosonajeros pueden amplificar y detectar señales de tipos separados de nanosondas sin necesidad de una máquina costosa o un profesional médico para leer los resultados. Crédito:Tuan Vo-Dinh, Universidad de Duke
Esas estrictas tolerancias son esenciales para controlar la mejora de la señal Raman que producen los nanosonajeros.
Cuando un láser brilla sobre los nanosonajeros, viaja a través de la capa exterior extremadamente delgada y golpea a los reporteros Raman que se encuentran dentro, lo que hace que emitan su propia luz. Debido a lo cerca que están las superficies del núcleo de oro y la capa exterior de oro/plata, el láser también excita grupos de electrones en las estructuras metálicas, llamados plasmones. Estos grupos de electrones crean un campo electromagnético extremadamente poderoso debido a la interacción de los plasmones con la arquitectura metálica de núcleo-cáscara, un proceso llamado acoplamiento plasmónico, que amplifica millones de veces la luz emitida por los reporteros Raman.
"Una vez que tuvimos los nanosonajeros funcionando, queríamos hacer dispositivos de biodetección para detectar enfermedades infecciosas o cánceres antes de que las personas supieran que están enfermas", dijo Vo-Dinh. "Con lo poderosa que es la mejora de la señal de los nanosonajeros, pensamos que podríamos hacer una prueba simple que cualquier persona pudiera leer fácilmente en el punto de atención".
En el nuevo artículo, Vo-Dinh y sus colaboradores aplican la tecnología de nanorattle a un dispositivo de laboratorio en un palo capaz de detectar cánceres de cabeza y cuello, que aparecen en cualquier lugar entre los hombros y el cerebro, generalmente en la boca, la nariz y garganta. La tasa de supervivencia de estos cánceres ha oscilado entre el 40 y el 60 por ciento durante décadas. Si bien esas estadísticas han mejorado en los últimos años en los Estados Unidos, han empeorado en entornos de bajos recursos, donde los factores de riesgo como fumar, beber y masticar nueces de betel son mucho más frecuentes.
"En entornos de bajos recursos, estos cánceres a menudo se presentan en etapas avanzadas y tienen malos resultados debido en parte al equipo de examen limitado, la falta de trabajadores de la salud capacitados y programas de detección esencialmente inexistentes", dijo Walter Lee, profesor de cabeza y cuello. cirugía y ciencias de la comunicación y oncología radioterápica en Duke, y colaborador en la investigación.
"Tener la capacidad de detectar estos cánceres temprano debería conducir a un tratamiento más temprano y a una mejora en los resultados, tanto en la supervivencia como en la calidad de vida", dijo Lee. "Este enfoque es emocionante, ya que no depende de la revisión de un patólogo y podría usarse potencialmente en el punto de atención".
El dispositivo prototipo utiliza secuencias genéticas específicas que actúan como velcro para los biomarcadores que buscan los investigadores; en este caso, un ARNm específico que es excesivamente abundante en personas con cánceres de cabeza y cuello. Cuando el ARNm en cuestión está presente, actúa como una atadura que une los nanosonajeros a las perlas magnéticas. Luego, estas perlas se concentran y se mantienen en su lugar con otro imán mientras todo lo demás se enjuaga. Luego, los investigadores pueden usar un dispositivo portátil simple y económico para buscar la luz emitida por los nanosonajeros para ver si se detectó algún biomarcador.
En los experimentos, la prueba determinó si 20 muestras provenían o no de pacientes que tenían cáncer de cabeza y cuello con un 100% de precisión. Los experimentos también mostraron que la plataforma nanorattle es capaz de manejar múltiples tipos de nanosondas, gracias a un algoritmo de aprendizaje automático que puede separar las señales separadas, lo que significa que pueden apuntar a múltiples biomarcadores a la vez. Este es el objetivo del proyecto actual del grupo financiado por los Institutos Nacionales de Salud.
"Muchos biomarcadores de ARNm son demasiado abundantes en múltiples tipos de cáncer, mientras que otros biomarcadores se pueden usar para evaluar el riesgo del paciente y el resultado del tratamiento futuro", dijo Vo-Dinh. "La detección de varios biomarcadores a la vez nos ayudaría a diferenciar entre los tipos de cáncer y también a buscar otros marcadores de pronóstico, como el virus del papiloma humano (VPH), y controles tanto positivos como negativos. una herramienta de diagnóstico que podría revolucionar la forma en que se detectan estos tipos de cáncer y otras enfermedades en áreas de bajos recursos". Nanoestrellas de oro plateadas detectan biomarcadores tempranos de cáncer