Por Carla Boulianne Actualizado el 24 de marzo de 2022
Las soluciones tampón resisten los cambios de pH porque contienen conjugados ácido-base débiles que neutralizan los iones H+ y OH-. Las soluciones tampón consisten en ácidos o bases débiles y la sal de ese ácido o base. La selección de un sistema tampón apropiado depende del rango de pH para el tampón. La mayoría de las reacciones biológicas ocurren en un rango de pH de 6 a 8. Los tampones de fosfato amortiguan en el rango de pH de 6,5 a 7,5. Los tampones de ácido carboxílico son útiles con un pH de 3 a 6. Los tampones de borato funcionan con un pH de 8,5 a 10. Los tampones de aminoácidos como la glicina y la histidina funcionan en una diversidad de rangos de pH. El tampón Tris es uno de los sistemas de tampón más utilizados en los laboratorios de biología. En el siguiente ejemplo se utilizarán cálculos para una solución tampón Tris, pero la metodología se aplica a cualquier solución tampón.
Utilice el producto de la molaridad y el volumen de la solución final para determinar los moles de base necesarios. Por ejemplo, si se necesitan 2 litros de una solución 0,1 M de tampón Tris, entonces el número de moles de Tris necesarios es:
0,1 moles/litro x 2 litros =0,2 moles Tris base
Calcule la masa de tampón requerida multiplicando el número de moles necesarios por el peso molecular de la base. Por ejemplo, la masa de 0,2 moles de Tris base es igual a:
0,2 moles de Tris x 121,1 g/mol de Tris =24,22 g de Tris
Mida la masa adecuada de base en una báscula.
Disuelva la base en agua destilada usando una barra agitadora magnética y una placa caliente para agitar. Disuélvalo en un volumen de agua ligeramente menor que el volumen de la solución final (950 a 975 ml por cada litro de solución final). El pH del tampón Tris cambia con la concentración y necesita un reajuste si se utiliza un volumen inicial demasiado pequeño. También es mejor preparar el tampón a la misma temperatura que se utilizará durante el ensayo o experimento, ya que Tris tiene grandes cambios de pH dependientes de la temperatura.
Valore la solución acuosa de Tris con ácido clorhídrico 1 M usando un medidor de pH.
Lleve la solución al volumen final con agua destilada en un matraz aforado.
Para ahorrar tiempo al preparar una solución tampón, puede utilizar concentrados de tampón prefabricados al pH requerido y diluirlos hasta obtener la molaridad y el volumen deseados.
Prepare la solución tampón a la misma temperatura que se utilizará para evitar cambios significativos de pH.
Evite ajustes de pH que requieren mucho tiempo, valore solo después de diluir a la concentración deseada. La disolución en un volumen demasiado pequeño dará lugar a valoraciones repetidas.
Tenga cuidado al manipular ácidos y bases.
Utilice gafas protectoras.
