Por Tammie Painter • Actualizado el 24 de marzo de 2022
cgj0212/iStock/GettyImages
La cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) y la cromatografía de gases (GC) son técnicas analíticas fundamentales que separan moléculas en función de su interacción con una fase estacionaria y una fase móvil. Si bien el principio básico (compuestos más pesados o menos polares que eluyen más lentamente) sigue siendo idéntico, los dos métodos difieren notablemente en sus parámetros operativos, diseño de columnas y compatibilidad de muestras.
La HPLC emplea una fase móvil líquida, normalmente una mezcla de disolvente orgánico (p. ej., acetonitrilo o metanol), agua ultrapura y aditivos que optimizan la solubilidad y la compatibilidad con el analito. Por el contrario, la GC utiliza una fase móvil gaseosa; Los portadores comunes incluyen helio, nitrógeno, argón o hidrógeno, elegidos en función de la volatilidad del analito y los requisitos del detector.
Las columnas de HPLC suelen ser tubos de metal o vidrio de 4 a 6 pulgadas de largo llenos de sílice o fases estacionarias poliméricas. Las columnas para GC, por otro lado, son tubos capilares en espiral cuyas paredes interiores están recubiertas con fases estacionarias adaptadas al análisis. Estos capilares pueden extenderse hasta 30 metros, lo que proporciona alta resolución para compuestos volátiles.
La GC es ideal para analitos volátiles y térmicamente estables:pequeñas moléculas orgánicas, gases y líquidos de bajo punto de ebullición. Las especies no volátiles, de alto peso molecular o cargadas (por ejemplo, sales, péptidos) son más adecuadas para la HPLC, que puede manejar matrices acuosas e iónicas sin necesidad de derivatización.
Las columnas de GC residen dentro de un horno; la temperatura está programada con precisión para optimizar la separación, y las temperaturas más altas aceleran la elución pero corren el riesgo de degradación del analito. Las columnas de HPLC generalmente se mantienen a temperatura ambiente o controlada, lo que garantiza una interacción constante entre la fase móvil y la fase estacionaria.
