1. Interacciones hidrofóbicas:
* Las proteínas son típicamente solubles en agua debido a sus grupos hidrofílicos (amantes del agua), que forman enlaces de hidrógeno con moléculas de agua.
* Sin embargo, también contienen grupos hidrofóbicos (con fábricas de agua) que tienden a agruparse.
2. Influencia de sulfato de amonio:
* Cuando se agrega sulfato de amonio a una solución de proteína, interactúa con las moléculas de agua, eliminándolas efectivamente de los grupos hidrofílicos de la proteína.
* Esta interrupción de las conchas de hidratación alrededor de la proteína expone los grupos hidrofóbicos.
3. Agregación y precipitación:
* A medida que aumenta la concentración de sulfato de amonio, los grupos hidrofóbicos en diferentes moléculas de proteínas se exponen e interactúan entre sí, lo que lleva a la agregación.
* Eventualmente, estos agregados crecen lo suficientemente grandes como para volverse insolubles y precipitar por solución.
Factores que afectan la precipitación:
* Concentración de proteínas: Las concentraciones de proteínas más altas requieren mayores concentraciones de sulfato de amonio para la precipitación.
* Tipo de proteína: Diferentes proteínas tienen diversos grados de hidrofobicidad, lo que lleva a diferentes sensibilidades a la precipitación de sulfato de amonio.
* ph: El pH de la solución puede influir en la carga de la proteína y su interacción con sulfato de amonio.
* Temperatura: Las temperaturas más altas generalmente mejoran la solubilidad en proteínas, lo que requiere mayores concentraciones de sulfato de amonio para la precipitación.
Aplicaciones de precipitación de sulfato de amonio:
* Purificación de proteínas: Es una técnica común para concentrar y purificar parcialmente proteínas de mezclas complejas.
* Cristalización: El sulfato de amonio puede usarse para promover la cristalización de proteínas, que es crucial para los estudios estructurales.
Ventajas del uso de sulfato de amonio:
* Relativamente económico y fácilmente disponible.
* Generalmente no denunciando a las proteínas, lo que significa que no destruye su estructura nativa.
* Permite la precipitación selectiva basada en propiedades de proteínas.
Consideraciones:
* Es crucial optimizar la concentración de sulfato de amonio para cada proteína específica y el resultado deseado.
* El precipitado puede contener otras moléculas además de la proteína objetivo, lo que requiere más pasos de purificación.
* Algunas proteínas pueden ser sensibles a las altas concentraciones de sal.
En conclusión, la precipitación de sulfato de amonio es una técnica valiosa para separar y purificar proteínas mediante la explotación de las diferencias en sus interacciones hidrofóbicas y la solubilidad en presencia de altas concentraciones de sal. .
