Iones de calcio (CA 2+ ) son no utilizado para inducir competencia artificial en bacterias. En cambio, cloruro de calcio (CaCl ₂ ) se usa.

He aquí por qué:

* Facilitar la absorción de ADN: CaCl ₂ El tratamiento hace que las células bacterianas sean más permeables al ADN, lo que les permite abordar el ADN exógeno de manera más eficiente. El mecanismo implica:

* desestabilización de la membrana celular: Ca 2+ Los iones interactúan con los grupos de cabeza de fosfolípidos cargados negativamente de la membrana celular, causando una ligera desestabilización. Esto hace que la membrana sea más "con fugas" y permite que ingrese el ADN.

* blindaje de ADN: El CA 2+ cargado positivamente Los iones neutralizan las cargas negativas en el ADN, evitando que se repele por la membrana celular cargada negativamente.

* Facilitar la unión de ADN: CaCl ₂ El tratamiento también puede promover la unión del ADN a la superficie celular bacteriana, facilitando la absorción.

* Choque de calor: Después de CaCl ₂ El tratamiento, las bacterias se someten a un breve choque térmico (típicamente 42 ° C durante 1-2 minutos). Este choque térmico interrumpe aún más la membrana celular y permite que el ADN ingrese a la célula.

¿Por qué no solo los iones de calcio?

Si bien los iones de calcio juegan un papel en el mecanismo, usarlos solo no sería efectivo. El cloruro de calcio proporciona la concentración necesaria de iones de calcio y también ayuda a mantener el equilibrio osmótico de la célula.

En resumen:

El cloruro de calcio se usa para la competencia artificial en bacterias porque facilita la absorción de ADN desestabilizando la membrana celular, protegiendo el ADN de la repulsión y promoviendo la unión del ADN. El paso de choque térmico mejora aún más la entrada de ADN.