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    Detección de dopaje con genes CRISPR / Cas

    Crédito:Sociedad Química Estadounidense

    Todos los atletas quieren estar en la cima de su juego cuando compiten, pero algunos recurren a enfoques nefastos para lograr un crecimiento muscular máximo, velocidad y agilidad. Los desarrollos recientes en la tecnología de edición de genes podrían tentar a los atletas a cambiar su ADN para obtener una ventaja. Ahora, investigadores que informan en ACS ' Química analítica demuestran los primeros pasos para detectar este tipo de dopaje tanto en plasma humano como en ratones vivos.

    El método de edición de genes llamado CRISPR / Cas es una forma popular para que los científicos cambien con precisión el ADN en muchos organismos. y recientemente ganó aún más atención cuando los desarrolladores clave del método recibieron el Premio Nobel de Química 2020. Con este método, los investigadores agregan una molécula de ARN y una proteína a las células. La molécula de ARN guía a la proteína hacia la secuencia de ADN apropiada, y luego la proteína corta el ADN, como unas tijeras, para permitir alteraciones. A pesar de las preocupaciones éticas que se han planteado sobre la posible aplicación del método en humanos, algunos atletas podrían ignorar los riesgos y hacer un mal uso de ellos para alterar sus genes. Debido a que CRISPR / Cas cambia el ADN, se considera "dopaje genético" y está prohibido por la Agencia Mundial Antidopaje, una organización internacional independiente. Es necesario desarrollar un método suficiente para detectar la edición de genes CRISPR / Cas, sin embargo. Entonces, Mario Thevis y sus colegas querían ver si podían identificar la proteína con más probabilidades de ser utilizada en este tipo de dopaje. Cas9 de la bacteria Streptococcus pyogenes (SpCas9), en muestras de plasma humano y en modelos de ratón.

    El equipo añadió la proteína SpCas9 al plasma humano, luego aisló la proteína y la cortó en trozos. Cuando las piezas fueron analizadas por espectrometría de masas, Los investigadores descubrieron que podían identificar con éxito componentes únicos de la proteína SpCas9 a partir de la compleja matriz plasmática. En otro experimento, SpCas9 inactivado, que puede regular la expresión génica sin alterar el ADN, se añadió a muestras de plasma humano. Con una ligera modificación, el método permitió al equipo purificar y detectar la forma inactiva. Finalmente, el equipo inyectó a ratones con SpCas9 y demostró que sus concentraciones alcanzaban su punto máximo en la sangre circulante después de 2 horas y podían detectarse hasta 8 horas después de la administración en el tejido muscular. Los investigadores dicen que, aunque todavía queda mucho trabajo por hacer, este es un paso inicial hacia una prueba para identificar a los atletas que intentan obtener una ventaja injusta.




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