Por Stacy Taylor | Actualizado el 30 de agosto de 2022
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El ADN, o ácido desoxirribonucleico, es el modelo genético alojado dentro del núcleo de una célula. Extraerlo requiere una serie de pasos cuidadosamente orquestados:lisar suavemente la célula, romper la membrana nuclear, separar el ADN de las proteínas y, finalmente, precipitar la hebra purificada. Las sales de sodio, más comúnmente cloruro de sodio, desempeñan un papel fundamental tanto en la estabilización del ADN liberado como en el impulso de su precipitación.
El ADN está compuesto por dos cadenas complementarias de nucleótidos unidas por un esqueleto de azúcar y fosfato. Las hebras se retuercen formando una doble hélice, en la que las proteínas histonas y otros factores de la cromatina mantienen el plegamiento adecuado y evitan enredos. En su entorno acuoso natural, los grupos fosfato cargados negativamente hacen que el ADN sea altamente polar, lo que explica su solubilidad en agua.
La polaridad describe moléculas que transportan distribuciones desiguales de carga eléctrica. Como señala Paul Zumbo del Cornell Medical College, todos los ácidos nucleicos son polares. Las cargas negativas de la columna vertebral de fosfato interactúan con las cargas positivas parciales de las moléculas de agua, lo que permite que el ADN permanezca disuelto. Para recuperar ADN para aplicaciones posteriores, debemos eliminarlo de esta fase acuosa.
Después de lisar la célula, el ADN se libera en una solución salina. Los iones de sodio añadidos protegen las cargas negativas de la columna vertebral, neutralizando eficazmente el ADN y debilitando su interacción con el agua. La introducción de un alcohol no polar (etanol o isopropanol) obliga al ADN y a los iones de sodio a formar un complejo compacto. Debido a que el alcohol no puede solvatar las moléculas cargadas, el ADN precipita, lo que permite la recolección mediante pipeteo suave o enrollándolo en una varilla de vidrio.
Para acceder al ADN, primero se deben alterar las membranas plasmática y nuclear. Esto generalmente se logra con un detergente que solubiliza las bicapas lipídicas. El dodecilsulfato de sodio (SDS) es un reactivo de laboratorio común, aunque incluso un jabón doméstico suave puede ser suficiente para los protocolos básicos. Cuando se utiliza material de origen vegetal, las paredes celulares requieren digestión enzimática antes de que el detergente pueda actuar.
Referencias
Paul Zumbo, Cornell Medical College – “La naturaleza polar de los ácidos nucleicos”
