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  • Tecnología e instrumentos de detección de PCR digital basados ​​en chips desarrollados

    Fig. Diagrama de flujo de trabajo del sistema de detección nano-dLAMP. Crédito:SIBET

    Un equipo conjunto de China proporcionó recientemente un multiplexación, método de detección cuantitativa para el diagnóstico precoz y la terapia dirigida de neoplasias mieloproliferativas, un tipo de tumor hematológico crónico que se acompaña de insuficiencia de la médula ósea o leucemia.

    El equipo, dirigido por Zhou Lianqun del Instituto de Ingeniería Biomédica y Tecnología de Suzhou de la Academia China de Ciencias y GUAN Ming del Hospital Huashan, estableció una plataforma de amplificación isotérmica mediada por bucle digital asistida por nanopartículas (nano-dLAMP) para el análisis de neoplasias mieloproliferativas.

    Reacción en cadena de la polimerasa digital (PCR digital, dPCR), una alta sensibilidad, tecnología de detección de ácidos nucleicos cuantitativa absoluta y de alta tolerancia, juega un papel importante en una variedad de campos de aplicación, como la detección de mutaciones raras, variación del número de copias, biopsia líquida, análisis unicelular, detección modificada genéticamente, prueba de carga viral, y análisis microbiológico cuantitativo.

    En este estudio, los investigadores fabricaron chips de microarrays con cuatro particiones físicas para la detección simultánea de calreticulina tipo 1, calreticulina tipo 2, janus quinasa 2 V617F y un gen de referencia interno.

    Luego utilizaron nanopartículas y aditivos de PCR para hacer que la amplificación isotérmica mediada por bucle tradicional (LAMP) fuera adecuada para la amplificación a escala de nanolitros.

    Los resultados sugirieron que las nanopartículas podrían mejorar el rendimiento de amplificación del nanolitro LAMP.

    La detección cuantitativa de los principales marcadores moleculares de neoplasias mieloproliferativas podría realizarse simultáneamente en un chip de microarrays de cuatro particiones en una hora. El acuerdo entre la plataforma desarrollada y el Quantstudio 3D comercial fue alto en un 99%.

    Esta precisa, rápido, multicine, y la plataforma nano-dLAMP económica podría ser una herramienta prometedora para el diagnóstico clínico en el futuro, según los investigadores.

    Los resultados del estudio se publicaron en Sensors &Actuators B:Chemical titulado "Establecimiento de tecnología LAMP digital de nanolitros escalables para la detección cuantitativa de marcadores moleculares de neoplasias mieloproliferativas múltiples".

    El grupo de Zhou se ha centrado en el campo de los biosensores durante más de 10 años, y ha acumulado una base sólida en el desarrollo de métodos de biosensor, diseño y procesamiento de biochips, y desarrollo de instrumentos de biociencia.

    En la investigación y el desarrollo de la PCR digital, método dPCR basado en chip (cdPCR) con alta estabilidad de aislamiento, Se desarrolló una buena uniformidad de temperatura y una velocidad de detección rápida. Se obtuvieron una serie de avances en el método de detección, chip, reactivo e instrumento de cdPCR.


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