HPLC ofrece un método rápido, automatizado y altamente preciso para identificar ciertos componentes químicos en una muestra, pero puede ser costoso, complejo y no funciona para todas las muestras. Los laboratorios médicos, forenses, ambientales y de fabricación utilizan la técnica para cuantificar y separar los productos químicos en una muestra. HPLC tiene ventajas y desventajas en comparación con otras técnicas.
HPLC y técnicas similares
Al igual que otras formas de cromatografía, HPLC permite la separación de constituyentes químicos mediante el uso de una fase móvil y una estacionaria fase. La fase móvil es líquida y la fase estacionaria es sólida. Debido a que los diferentes componentes se mueven a diferentes velocidades, se separan unos de otros. Las técnicas alternativas incluyen electroforesis capilar, donde las sustancias migran a través de soluciones en un campo eléctrico, y otros métodos cromatográficos como extracción en fase sólida, cromatografía de gases y cromatografía en capa fina.
Velocidad, Eficiencia y Precisión
En comparación con otras técnicas cromatográficas, como TLC, la HPLC es extremadamente rápida y eficiente. Utiliza una bomba, en lugar de gravedad, para forzar un disolvente líquido a través de un material adsorbente sólido, con diferentes componentes químicos que se separan a medida que se mueven a diferentes velocidades. El proceso puede completarse en aproximadamente 10 a 30 minutos y entrega alta resolución. Es preciso y altamente reproducible. Debido a que es en gran medida automática, se pueden realizar ejecuciones HPLC básicas con una capacitación mínima.
Costo y Complejidad
A pesar de sus ventajas, la HPLC puede ser costosa y requiere grandes cantidades de compuestos orgánicos costosos. Técnicas como la extracción en fase sólida y la electroforesis capilar pueden ser más baratas e incluso más rápidas, especialmente para el análisis bajo buenas prácticas de fabricación. Aunque es relativamente fácil utilizar los métodos HPLC existentes, puede ser complejo solucionar problemas o desarrollar nuevos métodos. Esto se debe principalmente a la variedad de módulos, columnas y fases móviles.
Sensibilidad y resolución
En general, la HPLC es versátil y extremadamente precisa cuando se trata de identificar y cuantificar componentes químicos. Con muchos pasos involucrados, la precisión de la HPLC se debe principalmente a que el proceso se automatiza y, por lo tanto, es altamente reproducible. HPLC tiene baja sensibilidad para ciertos compuestos, y algunos no se pueden detectar ya que se adsorben irreversiblemente. Las sustancias volátiles se separan mejor mediante cromatografía de gases.
