Los químicos usan la cromatografía líquida de alta resolución, o HPLC, para separar las mezclas de compuestos. En general, el método consiste en inyectar una muestra en una columna donde se mezcla con uno o más solventes. Diferentes compuestos se adsorben, o "se adhieren" a la columna en diferentes grados; y cuando el solvente empuja los compuestos a través de la columna, uno de los componentes de la mezcla saldrá primero de la columna. El instrumento detecta los compuestos a medida que salen de la columna y produce un cromatograma que consiste en una gráfica con el tiempo de retención en el eje xy la intensidad de la señal del detector en el eje y. A medida que los compuestos salen de la columna, producen "picos" en el cromatograma. En general, cuanto más separados y más estrechos sean los picos en el cromatograma, mayor será la resolución. Los científicos consideran una resolución de 1.0 o superior para representar una separación adecuada.

Mida el ancho de dos picos adyacentes en el cromatograma al observar dónde están los valores del eje x en la base de cada pico. El eje x representa el tiempo de retención, generalmente medido en segundos. Por lo tanto, si un pico comienza en 15.1 segundos y termina en 18.5 segundos, su ancho es (18.5 - 15.1) = 3.4 segundos.

Determine los tiempos de retención al anotar el tiempo, es decir, la ubicación en la x- eje, que corresponde a las ubicaciones de los máximos de los picos. Este valor normalmente será aproximadamente la mitad entre los dos valores utilizados para calcular el ancho en el paso 1. El ejemplo dado en el paso 1, por ejemplo, mostraría un máximo en aproximadamente 16.8 segundos.

Calcule la resolución, R , entre dos picos por

R = (RT1 - RT2) /[0.5 * (W1 + W2)],

donde RT1 y RT2 representan los tiempos de retención de los picos 1 y 2, y W1 y W2 representan el ancho de los picos tomados en sus bases. Continuando con el ejemplo de los pasos 2 y 3, un pico exhibe un tiempo de retención de 16.8 segundos y un ancho de 3.4 segundos. Si el segundo pico exhibe un tiempo de retención de 21.4 segundos con un ancho de 3.6 segundos, entonces la resolución sería

R = (21.4 - 16.8) /[0.5 * (3.4 + 3.6)] = 4.6 /3.5 = 1.3.