Aquí hay un enfoque general para calcular los resultados del ensayo:
1. Comprender el principio del ensayo: Sepa cómo funciona el ensayo (por ejemplo, colorimétrico, enzimático, inmunoquímico) y qué mide (por ejemplo, concentración, actividad, afinidad de unión).
2. Determine la curva estándar: Este es un gráfico que relaciona la señal del ensayo (por ejemplo, absorbancia, fluorescencia) con concentraciones conocidas del analito.
3. Obtenga la señal de la muestra: Esta es la medición de su muestra desconocida.
4. Use la curva estándar para encontrar la concentración correspondiente: Localice la señal de su muestra en la curva estándar y lea la concentración correspondiente.
Aquí hay algunos ejemplos de cálculos de ensayo comunes:
1. Ensayo colorimétrico:
* Fórmula: Concentración =(absorbancia de la muestra - absorbancia en blanco) / (pendiente de la curva estándar)
* Ejemplo: Si la absorbancia de su muestra es 0.5, la absorbancia en blanco es 0.1, y la pendiente de la curva estándar es 0.02, entonces la concentración es (0.5 - 0.1) / 0.02 =20 unidades.
2. Ensayo de actividad enzimática:
* Fórmula: Actividad =(ΔAbSorbance / ΔTime) x (1 / ε x l x v)
* Dónde:
* Δabsorbance es el cambio en la absorbancia con el tiempo
* ΔTime es el intervalo de tiempo sobre el cual se midió el cambio de absorbancia
* ε es el coeficiente de extinción molar del producto
* l es la longitud del camino de la cubeta
* V es el volumen de la mezcla de reacción
3. Ensayo ELISA:
* Fórmula: Concentración =(OD de muestra - OD de blanco) / (pendiente de la curva estándar)
* nota: Los ensayos ELISA a menudo usan una "curva estándar" generada a partir de concentraciones conocidas del analito objetivo.
Consideraciones importantes:
* unidades: Asegúrese de que las unidades para la concentración sean consistentes con el tipo de ensayo.
* Calibración: Calibre correctamente el instrumento utilizado para el ensayo.
* Controles: Use controles apropiados (por ejemplo, positivo, negativo, en blanco) para garantizar que el ensayo funcione correctamente.
* Validación del ensayo: Antes de usar un ensayo, es esencial validarlo para garantizar la precisión y la precisión.
Para cálculos de ensayo específicos, deberá consultar las instrucciones del fabricante o un protocolo detallado.
