Recientemente, un grupo de investigación dirigido por el profesor Yang Liangbao de los Institutos Hefei de Ciencias Físicas (HFIPS) de la Academia China de Ciencias (CAS) desarrolló una estrategia de lectura de espectroscopía Raman mejorada en superficie (SERS) in situ para mejorar la confiabilidad de la beta-galactosidasa ensayo de actividad basado en tinción con X-gal. Los resultados de investigaciones relevantes se han publicado en Talanta.

La actividad de la beta-galactosidasa (β-gal) está estrechamente relacionada con las células senescentes y las enfermedades asociadas al envejecimiento. La tinción con X-gal (5-bromo-4-cloro-3-indolil-β-D-galactósido) es el ensayo colorimétrico más ampliamente utilizado y disponible comercialmente con equipo de bajo costo y no intensivo.

Sin embargo, la lectura tradicional de la actividad de β-gal basada en la tinción con X-gal se limita a una baja sensibilidad en tiempos de incubación cortos y a falsos positivos en tiempos de incubación prolongados. Es difícil lograr positivos consistentes en la proliferación celular porque el estado de crecimiento de la célula a menudo no es homogéneo.

En este estudio, los investigadores revelaron el papel potencial de los hidrolizados de X-gal insolubles en la generación de falsos positivos. Hidrolizados de X-gal, causando contaminación por difusión difusa dependiendo del medio orgánico, puede orientar la estrategia de lectura como factor de evasión universal.

Como consecuencia, propusieron la estrategia de lectura de SERS in situ sensible y rápida para identificar y localizar células positivas para β-gal basándose en la tinción con X-gal.

Se demostró además que esta nueva estrategia era necesaria y factible. Resolvió los desafíos de la lectura tradicional, y eso será de gran importancia en diferentes aplicaciones, como la investigación relacionada con la edad y la terapia antienvejecimiento.