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    Cómo medir la temperatura óptima para una enzima

    Una enzima es una proteína que cataliza (aumenta la velocidad de) las reacciones químicas. La temperatura óptima de la mayoría de las enzimas, o la temperatura a la que las enzimas facilitan mejor las reacciones, es entre 35 y 40 grados Celsius. El aumento de la temperatura dentro de esta ventana aumenta la velocidad de reacción, porque excita las moléculas y aumenta la velocidad a la que las enzimas /reactantes chocan y reaccionan para producir el producto. Sin embargo, aumentar demasiado la temperatura puede desnaturalizar la enzima y evitar que funcione en absoluto.

    Determine la temperatura óptima de la enzima calentando la reacción en cantidades infinitesmales y tomando pequeñas muestras de la reacción, para determinar cuándo la tasa máxima de produciendo producto.

    Seleccione un método. Determine cómo va a medir la concentración de su producto en varios puntos del experimento. Por ejemplo, puede medir la concentración de muchos productos usando un espectrofotómetro y calcular la concentración a partir de la absorbancia, o midiendo la fluorescencia y calculando la concentración a partir de la fluorescencia.

    Configure su experimento. Coloque los reactivos y la enzima en un recipiente pequeño con tapa, como un vial de centelleo. La reacción comenzará. Coloque el vial de centelleo en un vaso de precipitados más grande con agua a temperatura ambiente. Coloque el vaso de precipitados en una placa de calentamiento. Coloque un termómetro dentro del vaso de precipitados. Esto le permite medir la temperatura de la reacción en varios puntos.

    Tome una muestra de 100 microlitros de la reacción a temperatura ambiente, alrededor de 25 grados Celsius. Enciende la placa de calentamiento. A distintas temperaturas entre 30 y 40 grados Celsius (30.5, 31, 31.5, etc.) tome muestras de 100 microlitros de su reacción.

    Determine la concentración de su producto a cada temperatura. Cuando la temperatura sube por encima de 40 grados Celsius, verá una disminución en la velocidad a la que el sustrato se convierte en producto, porque la enzima está desnaturalizada. El punto en el que el producto se produce a la velocidad máxima es el punto en el que la temperatura está en su punto óptimo.

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