El agar es una sustancia gelatinosa derivada de las paredes celulares purificadas de las algas rojas. Se agrega a los medios microbiológicos, que son materiales sobre los que se cultivan microorganismos en los laboratorios, para proporcionar una estructura más sólida a la sustancia. El agar no tiene valor nutricional, por lo que cuando los científicos lo usan para cultivar microorganismos, agregan varios nutrientes para aumentar el crecimiento bacteriano en placas de Petri o tubos de ensayo. Cuando los investigadores almacenan bacterias en un tubo de ensayo, se lo conoce como una inclinación de agar porque el medio de crecimiento líquido se solidifica mientras el tubo está en una posición inclinada. Una tapa con tapa de rosca en la inclinación evita que el agar se seque.
El medio se prepara de manera diferente para las inclinaciones que las placas de Petri. La esterilización se realiza con el agar en los tubos; las placas de Petri se esterilizan previamente antes de verterles agar agar esterilizado. Mida la cantidad de agua necesaria y colóquela en un matraz Erlenmeyer. Caliéntalo en una estufa hasta que esté casi hirviendo. Agregue otros ingredientes si es necesario y revuelva la mezcla lenta y constantemente hasta que se disuelvan. Estos ingredientes pueden incluir extractos de carne de res, peptona y tampones de pH, dependiendo del tipo de microorganismo que se esté cultivando.
Antes de agregar el polvo de agar deshidratado, mezcle con una pequeña cantidad de agua destilada fría para evitar la formación de bultos. Tenga cuidado al agregar agar al líquido caliente ya que puede hacer espuma y desbordar la olla. Agregue pequeñas cantidades de agar a la vez y revuelva para distribuir uniformemente el agar. Apague el fuego cuando la mezcla comience a vaporizarse, antes de que hierva.
Coloque los tubos de ensayo sin tapar en una rejilla para tubos de ensayo. Llene los tubos de ensayo transfiriendo aproximadamente 5 mililitros (aproximadamente 0,17 onzas o 1 cucharadita) del agar fundido de la olla con una pipeta estéril. Tape sin apretar cada uno de los tubos de ensayo, ya que el agar no se esterilizará si están sellados herméticamente. Esterilice todos los tubos en un autoclave durante aproximadamente 25 minutos a 121 grados Celsius, o 250 grados Fahrenheit.
Cuando el agar aún esté caliente, incline cuidadosamente el estante que sostiene los tubos de ensayo sobre una superficie sólida o un libro grueso, asegurándose de que el medio dentro de los tubos esté en una posición inclinada con respecto a los tubos de ensayo. Permita que el medio se enfríe y solidifique en este ángulo, lo que aumenta el área de superficie del agar. Apriete las tapas de los tubos de ensayo después de que el agar se haya enfriado. Los sesgos están listos para usar una vez que el agar se ha solidificado. Se pueden almacenar a temperatura ambiente o en el refrigerador para su uso futuro.
Inocular la inclinación transfiriendo células con un asa de inoculación de un microorganismo de una sola colonia en una placa a la superficie inclinada. Mueva el aro a través de la superficie de la inclinación y vuelva a tapar los tubos. Incubar la inclinación hasta que haya evidencia de crecimiento, luego colocar el tubo en el refrigerador.
