(PhysOrg.com) - La obtención de imágenes de células vivas a nivel molecular era apenas un sueño hace veinte años. Hoy dia, sin embargo, este sueño está cerca de hacerse realidad.
En el Instituto Max Planck de NanoBiophotonics en Göttingen, Stefan Hell (ganador del Premio Otto Hahn en 2009) ha desarrollado métodos de microscopía de fluorescencia para observar objetos en la nanoescala y con sus colegas Vladimir Belov y Christian Eggeling se ha realizado una nueva serie de tintes fotoestables que pueden usarse como marcadores fluorescentes. como se informó en un artículo de portada en Química:una revista europea .
Durante las últimas dos décadas, Stefan Hell y su grupo han revolucionado el arte de la microscopía más allá de los límites que se creían inquebrantables. Debido a las propiedades de onda (difracción) de la luz, la resolución de un microscopio óptico se limita a los detalles del objeto de aproximadamente 0,2 micrómetros. Las leyes de la física parecían prohibir los detalles de las imágenes más allá de este límite. Stefan Hell vio más allá de esta limitación y hace unos quince años su visión se concretó; desarrolló un método para observar objetos a escala nanométrica apagando secuencialmente la fluorescencia de moléculas cercanas mediante emisión estimulada, una técnica conocida como nanoscopia STED.
La sensibilidad de esta técnica depende del brillo de los marcadores de fluorescencia aplicados y su fotoestabilidad también es de gran importancia. El grupo NanoBiophotonics ha logrado sintetizar una serie de tintes altamente fotoestables y altamente fluorescentes. Estos compuestos emiten luz verde y naranja y se basan en derivados de flúor del conocido colorante rodamina. El uso de estos tintes en la nanoscopia STED conduce a imágenes de alta calidad con respecto al brillo y la relación señal / fondo; Además, la resolución sobre la de los microscopios ópticos más tradicionales se mejora significativamente, proporcionando información estructural más detallada.
Estos derivados de flúor a base de rodamina son aún más especiales debido a su versatilidad. Los compuestos están disponibles en formas hidrófilas y lipófilas, y con la inclusión de grupos amino reactivos, se pueden unir fácilmente a anticuerpos u otras biomoléculas en el curso de procedimientos estándar de marcaje e inmunotinción. El grupo demuestra que estos nuevos tintes son capaces de atravesar las membranas celulares y llegar al interior de las células vivas. lo que podría conducir a nuevas estrategias de etiquetado para sistemas biológicos. Todos los ojos están ahora puestos en Gotinga para ver hasta dónde puede llegar la nanoscopia óptica.
