La cromatografía es un método de separación de sustancias. Se implementa utilizando un tubo estrecho (columna) empaquetado con un material específico. Una mezcla de compuestos se fuerza a través de la columna usando presión. Cada compuesto sale de la columna durante ciertos momentos, representando gráficamente un pico en un cromatograma. La posición del pico máximo, llamado tiempo de retención, es específico para cada compuesto. El rendimiento de las columnas cromatográficas se expresa como un número de placas teóricas. Una placa teórica es una capa imaginaria dentro de una columna que ayuda a interpretar el proceso de separación. Un mayor número de placas teóricas corresponde a una mejor eficacia de la columna.
Obtenga un gráfico de cromatogramas de su columna cromatográfica.
Dibuje una línea vertical desde el máximo del pico hasta la línea base.
Mida la longitud de esta línea y divídala entre 2 para encontrar el centro de la línea. En estos pasos, realice todas las mediciones en milímetros (mm).
Dibuje una línea que pase por el centro de la línea y paralela a la línea de base.
Mida la longitud de la línea desde el paso 4 para obtener el ancho máximo a la mitad de la altura. Por ejemplo, el ancho del pico es de 12 mm.
Mida la distancia desde 0 hasta el máximo del pico para obtener el tiempo de retención. Por ejemplo, el tiempo de retención es de 650 mm. Tenga en cuenta que el tiempo de retención se expresa normalmente en minutos, pero también es proporcional a la longitud medida.
Divida el tiempo de retención entre el ancho máximo y eleve el cociente con el poder de 2. Luego, multiplique el resultado por 5.55 para calcular el número de placas teóricas:
Número de placas teóricas = 5.55 * (Tiempo de retención /ancho máximo) ^ 2
En nuestro ejemplo, sería 5.55 * (650 mm /12) mm) ^ 2 = 16,284 placas teóricas. El resultado se redondea al número entero.