Aunque no se pueden ver a simple vista, las bacterias están en todas partes. Existen en los alimentos, el suelo, el agua, las superficies dentro de nuestros hogares y en nuestros cuerpos. Las bacterias generalmente existen en poblaciones mixtas. El aislamiento de una bacteria específica de otras especies bacterianas en una muestra determinada permite a los microbiólogos estudiar su estructura y función, características que se utilizan en su identificación. Los microbiólogos a menudo aíslan bacterias usando una de varias técnicas de placa de veta.
Herramientas
Se usa un asa de inoculación para transferir microorganismos. Consiste en un alambre de nicrom o platino con un pequeño lazo circular en un extremo. El otro extremo es recto y se desliza en un mango. Los lazos de inoculación desechables de plástico también están disponibles. Las bacterias solo pueden aislarse si crecen. Los microbiólogos cultivan bacterias para el aislamiento de placas de rayas en placas de Petri redondas y poco profundas llenas de un medio sólido, llamado agar. Agar imita el entorno en el que crecen naturalmente las bacterias. Los platos llenos de medios son estériles y tienen tapa para evitar el crecimiento de organismos no deseados. Durante el aislamiento de la placa de vetas, el circuito de inoculación se esteriliza repetidamente en la llama de un mechero Bunsen.
Principio
La técnica de placa de vetas es el método más popular para aislar bacterias específicas de una muestra que contiene mezcla de microorganismos. La técnica esencialmente diluye la cantidad de organismos y reduce su densidad. Permite a los microbiólogos distinguir y aislar las colonias bacterianas individuales. Una colonia es un grupo visible de bacterias. Todas las bacterias en una sola colonia se originan en la misma célula bacteriana. En consecuencia, las colonias individuales son colonias "puras". La colonia pura se transfiere a otra placa para producir un cultivo puro que consiste en un tipo de bacteria.
Procedimiento
Cuando se hace correctamente, el aislamiento de placa raya diluye una muestra y permite que las células bacterianas individuales desarrollar en colonias aisladas. Un microbiólogo comienza por esterilizar el asa de inoculación en una llama. Ella enfría el bucle al tocarlo en el agar, luego sumerge el bucle en la muestra y lo extiende hacia adelante y hacia atrás para cubrir una sección del plato. Ella esteriliza el bucle, lo enfría e inocula una segunda sección adyacente de la placa arrastrando el bucle a través de la primera sección varias veces y cubriendo la segunda sección con un movimiento en zigzag. Esto capta una pequeña cantidad de bacterias de la primera sección y las transfiere a la segunda sección. El número de veces que se repite este procedimiento básico depende del método de la placa de rayado utilizado. A pesar del método, la muestra original se utiliza para inocular solo la primera sección de la placa.
Métodos
Los métodos de placa de rayas varían según el número de secciones de agar estriadas. El método T-streak utiliza tres secciones: la mitad superior y dos secciones inferiores de igual tamaño. El inóculo inicial se coloca en la mitad superior de la placa. Las bacterias se arrastran desde la sección superior a una de las secciones inferiores, luego desde esa sección inferior a la otra. En el método de cuadrantes, cuatro secciones de igual tamaño tienen rayas. El método de rayas continuas típicamente implica inocular la mitad superior de la placa, girarla 180 grados e inocular la otra mitad de la placa sin esterilizar el lazo ni arrastrar las bacterias de la sección anterior.
