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  • Las nanopartículas simplifican la identificación y cuantificación del ADN

    En un artículo publicado en Pequeña , los investigadores aplicaron con éxito un nuevo método cualitativo y cuantitativo para la detección de una secuencia de ADN característica del cinetoplasto de Leishmania infantum, un parásito frecuente en veterinaria que también afecta a los humanos.

    Superar la técnica de PCR clásica

    La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) es el método estándar actual para identificar la presencia de una secuencia de ADN específica en una muestra. La PCR utiliza enzimas y dos cebadores, hebras de secuencias cortas de ácido nucleico que sirven como punto de partida para la copia del ADN. Cuando la detección es positiva, esta técnica produce millones de copias de la secuencia del problema para facilitar su detección. Esta amplificación de ADN implica cambios térmicos precisos (termociclado) y equipos sofisticados y costosos, que son superados por un enfoque alternativo llamado amplificación isotérmica, realizado a temperatura constante.

    Los autores del artículo presentan un diseño novedoso de amplificación isotérmica utilizando cebadores marcados con nanopartículas de oro y microperlas magnéticas. El producto amplificado lleva ambos marcadores, lo que permite una rápida purificación y cuantificación. Las propiedades magnéticas del primer cebador facilitan la purificación / preconcentración del ADN amplificado mediante métodos de separación magnética. Por otra parte, las nanopartículas de oro se cuantifican fácilmente mediante métodos sencillos de detección electrocatalítica. Por lo tanto, el uso de cebadores marcados con nanopartículas de oro y microperlas magnéticas convierte la amplificación isotérmica en un método de diagnóstico cualitativo y cuantitativo más rápido y sencillo.

    Nanopartículas para la detección de Leishmania y otras pruebas en el lugar de atención

    Este enfoque se aplicó con éxito para la detección de una secuencia de ADN característica del cinetoplasto de Leishmania infantum, un parásito responsable de una enfermedad en perros domésticos, cánidos salvajes y humanos. El método electroquímico mostró una buena reproducibilidad y sensibilidad. Es más, El ADN amplificado de perros sin Leishmania se discriminó perfectamente, demostrando la especificidad tanto del procedimiento de amplificación como de la detección electroquímica. De hecho, el rendimiento del enfoque propuesto es mejor que el obtenido con otras pruebas en el punto de atención para la detección de Leishmania, ofreciendo también una herramienta cuantitativa para la determinación de parásitos. Este método representa una metodología universal que podría aplicarse a cualquier diseño de amplificación de ADN isotérmico.


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